ONSSI株式会社のタンパク質解析受託サービスについて

お客様にて電気泳動とゲルの染色を行って頂きます。
染色後、SDS-PAGEのゲルから目的のバンドあるいは二次元電気泳動のゲルから目的のスポットを切り出してチューブに入れて頂き、弊社まで冷蔵で輸送して頂きます。弊社にてサンプルを受け取り後、脱色、トリプシンを用いたゲル内酵素消化、ナノLC-MS/MS解析を行います。弊社では質量分析計はLTQ Orbitrap XL（Thermo Fisher Scientific）、HPLCはParadigm（AMR）を用いています。
質量分析計により得られたデータはProteome discoverer ver1.3（サーチエンジンはMASCOTを使用）によって解析することでタンパク質を同定します。
解析結果をメールにて送付致します。

注意点

• ゲル染色の際は、グルタルアルデヒド（架橋性固定剤）を含む銀染色キットを用いますとタンパク質に化学的修飾が生じてしまうため、トリプシンによるタンパク質の消化効率が著しく低下します。そのため、グルタルアルデヒド含まないMS解析用グレード（銀染色MSキット、富士フイルム和光純薬 、型番299-58901）のご使用を指定させて頂きます。切り出したゲル片につきましては弊社で脱色を行いますので、お客様での脱色作業は不要です。
• 銀染色MSキットで染色したゲルは、バンドを切り出す前に写真撮影をお願いします。また、ゲルから切り出したバンドの位置情報を写真に記載することをお願いします。銀染色での染色強度が極端に低いサンプルは弊社にて分析をお断りさせて頂く場合がございますので、その際はご了承のほどよろしくお願い致します。
• ゲル片を入れるチューブはエッペンドルフ社製のSafe-LockTubes 1.5 ml, Order no:0033 120.086のご使用を指定させて頂きます。分析に必要な必要な本数をご連絡頂けましたら弊社から輸送も可能です。
• 質量分析は高感度でありますので、サンプル調製中にケラチンなどのコンタミネーションにご注意ください。コンタミネーションしますと、質量分析を用いた解析でケラチンなどのタンパク質が同定され、その結果、目的タンパク質が同定されにくくなります。質量分析計による測定を行うためのサンプル調製は、作業時に常にゴム手袋を着用するなどケラチンなどのコンタミネーションが起きないようにご注意をお願い致します。
  また、電気泳動を行う際は、プレキャストゲルを使用されることを推奨します。電気泳動や染色、ゲル切り出しに用いる器具類をよく洗浄することで、ケラチンなどのコンタミネーション防止にご協力をお願いします。冬季の乾燥する時期は、静電気によるウール製品からのコンタミネーションも起こりえますので、コンタミネーションしないようにご注意ください。